蚯蚓溶解酶的凍幹技術

    蚯蚓纖溶酶具有直接水解纖維蛋白和激活血纖維蛋白溶酶原成血纖維蛋白溶酶，有抗栓和溶栓作用。生物凍幹機設備是利用生物真空冷凍幹燥技術，進行各種生物製品凍幹、人參提取凍幹、蛋白酶凍幹、益生菌凍幹、龜膏凍幹、多肽凍幹、花青素凍幹、蚯蚓纖溶酶凍幹等加工生產(chan) 。其中蚯蚓纖溶酶凍幹粉製作工藝是經過一係列的前處理後采用真空冷凍幹燥工藝，得到原有營養(yang) 成分和活性物質的蚯蚓纖溶酶凍幹粉。

蚯蚓纖溶酶凍幹粉製造工藝具體(ti) 如下：

1）製作蚯蚓粗粉：將活蚯蚓饑餓自然吐淨泥沙，清洗，風幹後低溫粉碎，再進行過篩製成蚯蚓粗粉；

  2）製作粗酶溶液：將蚯蚓粗粉用磷酸緩衝(chong) 液PBS和氯化鈉溶液均勻後置於(yu) 2~8℃冷櫃靜置12小時，在經過離心，得到上清液。再將上清液進行水浴處理後進行第二次離心取上清液，在上清液中加硫酸銨達靜置後進行第三次離心，得到蚯蚓纖溶酶粗酶溶液；

3）粗酶純化和修飾：將蚯蚓纖溶酶粗酶溶液過Sephadex G75凝膠層析，經過衝(chong) 液洗脫得到蚯蚓纖溶酶純酶。再加入活化的PEG修飾劑和硼酸緩衝(chong) 液，進行保溫反應，在經過磷酸緩衝(chong) 液透析和離心進行上清液純化，收集活性成分得到蚯蚓纖溶酶修飾酶；

4）蚯蚓纖溶酶冷凍幹燥：將蚯蚓纖溶酶修飾酶裝盤，料厚8mm左右，進行-45℃低溫冷凍300min，而後在35pa真空下，進行一次幹燥控溫範圍-30~10℃，升華幹燥時間720min,除去大部分流離水，然後進行解析幹燥控溫範圍10~40℃，幹燥運行時間860min。經中生物凍幹機的終點判斷確定，凍幹結束得到含水1%以內(nei) 的蚯蚓纖溶酶凍幹粉。